Evaluación de los niveles de producción de Iduronato 2-Sulfato sulfatasa (IDS) en dos cepas de Pichia pastoris bajo condiciones limitadas de oxígeno y sustrato
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Fecha
2013Autor(es)
Pimentel Vera, Luisa NataliaPublicador
Pontificia Universidad Javeriana
Facultad
Facultad de Ciencias
Programa
Microbiología Industrial
Título obtenido
Microbiólogo (a) Industrial
Tipo
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
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Citación
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Resumen
El objetivo principal de este trabajo fue caracterizar los niveles de producción de la enzima iduronato 2-sulfato sulfatasa humana recombinante (IDS) producida en P. pastoris GS115, bajo condiciones limitadas de oxígeno y sustrato, empleando tanto un gen nativo como optimizado. Donde se observó que, a escala de bioreactor los mayores valores de actividad enzimática se presentaron bajo condiciones limitadas de oxígeno y mediante empleo de la secuencia IDS optimizada, siendo estos de 1,57 U/mg, 34 veces mayores que los obtenidos con el uso del gen nativo. Estos resultados constituyen información importante en el desarrollo de una terapia de reemplazo enzimático para la enfermedad de Hunter.
Abstract
The main object of this work was characterization of the expression levels of the human enzyme Iduronate 2-sulphate suIfatase (IDS) in Pichiapastoris GS115, under limited oxygen and substrate conditions, using a wild and an optimized gen. where we found that on bioreactor scale the ighest values of enzyme activity were submitted under limited oxygen condition and by use of an optimized IDS sequence, these being 1,57 U/mg, 34 times higher than those obtained using the native gene. These results provide relevant information on the development of enzyme replacement therapy for Hunter disease.
Palabras clave
Síndrome de HunterKeywords
Hunter syndromeTemas
Iduronato SulfatasaPichia pastoris
Mucopolisacaridosis II
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicas
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