Evaluación de la susceptibilidad antifúngica, caracterización proteómica y virulencia de aislamientos clínicos colombianos en Cryptococcus neoformans

Abstract

Estudios han demostrado diferentes características fenotípicas relacionadas con la virulencia de Cryptococcus neoformans, revelando su importancia en la patogenicidad. El propósito de nuestra investigación fué evaluar la relación entre la susceptibilidad o resistencia a antifúngicos a través de los lineamientos de CLSI con la técnica de microdilución y la capacidad patogénica de aislamientos clínicos de C. neoformans en el modelo invertebrado de Galleria mellonella. Para lo cual fueron seleccionados 29 aislamientos clínicos, según el desenlace clínico y origen geográfico del paciente. En la evaluación de la patogenicidad se emplearon controles de alta (H99) y baja (JEC21) patogenicidad, se determinó el tamaño capsular antes y después de la inoculación, así como la capacidad fagocítica, la actividad enzimática, el tipo de pareja sexual, y la susceptibilidad a Anfotericina B, Voriconazol y Fluconazol mediante los lineamientos del CLSI. El 100% de los aislamientos fueron sensibles a Anfotericina B y a Voriconazol. El 6.8% SSD a fluconazol (MIC ≥16- 32μg/ml) y el 92,4% fueron sensibles a Fluconazol. La mortalidad en G. mellonella fue de 8 días (p < 0,05); de los 29 aislamientos 5 presentaron una media de supervivencia de 2 y 3 días comparados con H99 (p< 0,01). El promedio del porcentaje de fagocitosis fue de 22% (Valor maximo76% y Valor mínimo 3%), el tamaño celular y capsular posterior a la inoculación con C. neoformans aumento 2.84 μm. La actividad enzimática fue del 41.3% en proteasas; y 37.9% fenoloxidasa. El 97.3% de los aislamientos clínicos fueron pareja sexual tipo alfa. No se encontró relación entre las características fenotípicas específica y la susceptibilidad antifúngica en la determinación de un perfil de alta o de baja patogenicidad.