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dc.rights.licenseDe acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.spa
dc.contributor.advisorAlméciga Díaz, Carlos Javier
dc.contributor.advisorEspejo Mojica, Angela Johana
dc.contributor.authorContreras Bolívar, Nicolás
dc.coverage.spatialAmérica Latinaspa
dc.coverage.temporal2018-2019spa
dc.date.accessioned2020-01-23T20:45:22Z
dc.date.accessioned2020-04-15T20:22:41Z
dc.date.available2020-01-23T20:45:22Z
dc.date.available2020-04-15T20:22:41Z
dc.date.created2019-06-09
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10554/46744
dc.description.abstractLos fructooligosacáridos (FOS) son hidratos de carbono de carácter prebiótico que tienen la capacidad de ser asimilados y degradaos únicamente por bacterias benéficas en el tracto gastrointestinal de humanos y animales. Estos polímeros son sintetizados gracias a la unión de moléculas de fructosa a moléculas de sacarosa mediante enlaces (1-2) mediante la acción de enzimas como fructosiltransferasa (FTasa) y β-fructosidasa las cuales son producidas naturalmente por microrganismos como Aspergillus oryzae, Aspergillus japonicas, Aspergillus sydowi, Schawanniomyces occidentalis y Candida utilis. Estas enzimas tienen la capacidad de hidrolizar una molécula de sacarosa y por ende liberar unidades de fructosa y glucosa, posteriormente transfiere las unidades libres de fructosa a aceptores como otra molécula de sacarosa u otro FOS. Sin embargo, la obtención de esta enzima a nivel industrial no es fácil por la complejidad que representa el uso de microrganismos filamentosos. Adicionalmente, estudios previos han demostrado que la enzima FTasa recombinante no ha obtenido buenos rendimientos en la producción de FOS. Por lo tanto, en este trabajo se sintetizó de manera recombinante la proteína β-fructosidasa en P. pastoris GS115 y se evaluó la producción de esta enzima a escala de 10 mL, 100 mL y 1.7 L (biorreactor). Se determinó que el clon Mut+(S23) presenta poca actividad hidrolítica y presenta preferencia hacia la actividad transfructosilante, por ende, esta muestra se seleccionó para ser producida a escala de biorreactor en donde obtuvo el mismo comportamiento pero con leves incrementos en las actividades enzimáticas. Sin embargo, cuando se comparan estos resultados con los reportados en la literatura, los obtenidos experimentalmente son bajos, lo cual se podría explicar a la dificultad que tienen los sustratos de ingresar al sitio activo de la proteína lo cual se evidenció en determinaciones bioinformáticas y al uso de condiciones de reacción no óptimas.spa
dc.description.sponsorshipPontificia Universidad Javerianaspa
dc.formatPDFspa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.language.isospaspa
dc.publisherPontificia Universidad Javerianaspa
dc.rightsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Colombia*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/*
dc.subjectFructooligosacáridosspa
dc.subjectPrebióticospa
dc.subjectAspergillus oryzaespa
dc.subjectFTasaspa
dc.subjectβ-fructosidaspa
dc.titleProducción y caracterización de la proteína recombinante β-fructosidasa de Aspergillus oryzae N74 en Pichia pastoris GS115spa
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.hasversioninfo:eu-repo/semantics/draft
dc.coverage.departmentCundinamarca (Colombia)spa
dc.coverage.cityBogotá (Colombia)spa
dc.title.englishProduction and characterization of the recombinant protein β-fructosidase from Aspergillus oryzae N74 in Pichia pastoris GS115spa
dc.contributor.evaluatorRivera Hoyos, Claudia Marcela
dc.subject.keywordFructooligosaccharidesspa
dc.subject.keywordPrebioticspa
dc.subject.keywordAspergillus oryzaespa
dc.subject.keywordFTasespa
dc.subject.keywordβ-fructosidasespa
dc.description.abstractenglishFructooligosaccharides (FOS) are carbohydrates of a prebiotic nature that can be assimilated and degraded only by beneficial bacteria in the gastrointestinal tract of humans and animals. These polymers are synthesized thanks to the union of fructose molecules to sucrose molecules through "beta" (1-2) bonds through the action of enzymes such as fructosyltransferase (FTase) and β-fructosidase which are naturally produced by microorganisms such as Aspergillus oryzae, Aspergillus japonicas, Aspergillus sydowi, Schawanniomyces occidentalis and Candida utilis. These enzymes can hydrolyze a sucrose molecule and thus release fructose and glucose units, subsequently transfer the free fructose units to acceptors such as another sucrose molecule or another FOS. However, obtaining this enzyme at the industrial level is not easy because of the complexity of the use of filamentous microorganisms. Additionally, previous studies have shown that the recombinant FTase enzyme has not obtained good yields in the production of FOS. Therefore, in this work, the β-fructosidase protein was recombinantly synthesized in P. pastoris GS115 and the production of this enzyme was evaluated on a scale of 10 mL, 100 mL and 1.7 L (bioreactor). It was determined that the Mut + clone (S23) has little hydrolytic activity and has a preference for transfructosilant activity, therefore, this sample was selected to be produced at the bioreactor scale where it obtained the same behavior but with slight increases in enzymatic activities. However, when these results are compared with those reported in the literature, those obtained experimentally are low, which could be explained by the difficulty of the substrates to enter the active site of the protein which was evidenced in bioinformatic determinations and when the use of non-optimal reaction conditions.spa
dc.rights.accessrightsAcceso Abiertospa
dc.publisher.programMicrobiología Industrialspa
dc.publisher.facultyFacultad de Cienciasspa
dc.type.localTrabajo de grado Pregradospa
dc.subject.armarcMicrobiología industrial - Tesis y disertaciones académicasspa
dc.subject.armarcAspergillusspa
dc.subject.armarcPrebióticosspa
dc.subject.armarcFructosaspa


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De acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.
Except where otherwise noted, this item's license is described as De acuerdo con la naturaleza del uso concedido, la presente licencia parcial se otorga a título gratuito por el máximo tiempo legal colombiano, con el propósito de que en dicho lapso mi (nuestra) obra sea explotada en las condiciones aquí estipuladas y para los fines indicados, respetando siempre la titularidad de los derechos patrimoniales y morales correspondientes, de acuerdo con los usos honrados, de manera proporcional y justificada a la finalidad perseguida, sin ánimo de lucro ni de comercialización. De manera complementaria, garantizo (garantizamos) en mi (nuestra) calidad de estudiante (s) y por ende autor (es) exclusivo (s), que la Tesis o Trabajo de Grado en cuestión, es producto de mi (nuestra) plena autoría, de mi (nuestro) esfuerzo personal intelectual, como consecuencia de mi (nuestra) creación original particular y, por tanto, soy (somos) el (los) único (s) titular (es) de la misma. Además, aseguro (aseguramos) que no contiene citas, ni transcripciones de otras obras protegidas, por fuera de los límites autorizados por la ley, según los usos honrados, y en proporción a los fines previstos; ni tampoco contempla declaraciones difamatorias contra terceros; respetando el derecho a la imagen, intimidad, buen nombre y demás derechos constitucionales. Adicionalmente, manifiesto (manifestamos) que no se incluyeron expresiones contrarias al orden público ni a las buenas costumbres. En consecuencia, la responsabilidad directa en la elaboración, presentación, investigación y, en general, contenidos de la Tesis o Trabajo de Grado es de mí (nuestro) competencia exclusiva, eximiendo de toda responsabilidad a la Pontifica Universidad Javeriana por tales aspectos. Sin perjuicio de los usos y atribuciones otorgadas en virtud de este documento, continuaré (continuaremos) conservando los correspondientes derechos patrimoniales sin modificación o restricción alguna, puesto que, de acuerdo con la legislación colombiana aplicable, el presente es un acuerdo jurídico que en ningún caso conlleva la enajenación de los derechos patrimoniales derivados del régimen del Derecho de Autor. De conformidad con lo establecido en el artículo 30 de la Ley 23 de 1982 y el artículo 11 de la Decisión Andina 351 de 1993, “Los derechos morales sobre el trabajo son propiedad de los autores”, los cuales son irrenunciables, imprescriptibles, inembargables e inalienables. En consecuencia, la Pontificia Universidad Javeriana está en la obligación de RESPETARLOS Y HACERLOS RESPETAR, para lo cual tomará las medidas correspondientes para garantizar su observancia.