Implementación de un sistema in vitro para la evaluación fenotípica y funcional de la interacción de Células Dendríticas con Células NK
Fecha
2020-12-14Evaluador(es)
Patarroyo Gutierrez, Manuel AlfonsoPublicador
Pontificia Universidad Javeriana
Facultad
Facultad de Ciencias
Programa
Biología
Título obtenido
Biólogo (a)
Autor(es) Corporativo(s)
Pontificia Universidad Javeriana
Tipo
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
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Citación
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Título en inglés
Implementation of an in vitro system for the phenotypic and functional evaluation of the interaction of Dendritic Cells with NK CellsResumen
La interacción entre Células Dendríticas (DCs) y NKs juega un papel importante en la inducción de
inmunidad. El diseño de un sistema in vitro que permita analizar factores que influencian la calidad de
la interacción cooperativa entre estas dos células lo consideramos importante. En este trabajo utilizando
muestras de sangre se comparó ex vivo el porcentaje e inmunofenotipo de monocitos, NKs totales y de
diferentes subpoblaciones de NKs definidas de acuerdo con la expresión diferencial de los marcadores
CD56 y CD16, tanto en Sangre Total como en PBMCs entre individuos Jóvenes y Adultos Mayores de
60 años. Los análisis ex vivo evidenciaron alteraciones en la representatividad de subpoblaciones de NKs
evidenciada en Sangre Total que no fueron claramente detectadas cuando se utilizaron PBMCs. De otra
parte, un sistema de cultivo in vitro de DCs cocultivadas con NKs fue implementado con el fin de evaluar
la influencia de la edad y la interacción célula-célula en la mutua activación de estas dos células. Estos
cocultivos permitieron evidenciar una capacidad de DCs maduras e inmaduras de inducir la activación
de células NKs autólogas y la capacidad de NKs activadas por agonistas de TLRs de potenciar tanto la
maduración de DCs maduras como la maduración de DCs inmaduras autólogas. De manera interesante
los resultados de los cocultivos de NKs con DCs mostraron (i) que las funciones anotadas son
dependientes de la interacción célula-célula; (ii) una capacidad disminuida de las NKs de Adultos
Mayores activadas, con respecto a las de individuos Jóvenes, para inducir la maduración de DCs
inmaduras autólogas y (iii) una deficiencia de DC maduras de Adultos Mayores para inducir la activación
de NKs autólogas. En conjunto los resultados sugieren la validez del sistema de cocultivos
implementados para analizar factores asociados al envejecimiento y a la interacción célula-célula que
modulan la interacción de NKs y DCs.
Abstract
The interaction between Dendritic Cells (DCs) and NKs plays an important role in the induction of immunity. We consider important the design of an in vitro system that allows us to analyze factors that influence the quality of the cooperative interaction between these two cells. In this work, using blood samples, the percentage and immunophenotype of monocytes, total NKs and of different subpopulations of NKs (defined according to the differential expression of the markers CD56 and CD16) were compared ex vivo, both in Whole Blood and in PBMCs among Young individuals. and Adults over 60 years old. The ex vivo analyzes evidenced alterations in the representativeness of subpopulations of NKs evidenced in Whole Blood that were not clearly detected when PBMCs were used. On the other hand, an in vitro culture system of DCs cocultivated with NKs was implemented in order to evaluate the influence of age and cell-cell interaction on the mutual activation of these two cells. These cocultures made it possible to show an ability of mature and immature DCs to induce the activation of autologous NKs cells and the capacity of NKs activated by TLR agonists to enhance both the maturation of mature DCs and the maturation of autologous immature DCs. Interestingly, the results of the cocultures of NKs with DCs showed (i) that the noted functions are dependent on cell-cell interaction; (ii) a decreased ability of activated Older Adult NKs, relative to Young individuals, to induce the maturation of autologous immature DCs and (iii) a deficiency of mature Older Adult DCs to induce the activation of autologous NKs. Together, the results suggest the validity of the coculture system implemented to analyze factors associated with aging and cell-cell interaction that modulate the interaction of NKs and DCs.
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