Evaluación de la internalización de proteínas pegiladas probióticas en células intestinales humanas y su efecto en la expresión de la proteína de unión celular ocludina

Abstract

En los últimos años, el estudio de probióticos para el tratamiento de la Enfermedad Diarreica Aguda (EDA) en niños ha sido de gran interés debido a múltiples estudios que sugieren que estos poseen actividad anti-rotavirus y poseen la capacidad de reducir el tiempo de la diarrea. El grupo de investigación en virología de la Pontificia Universidad Javeriana ha realizado estudios de la actividad anti-rotavirus y del efecto citotóxico en células intestinales C2BBe1 ejercidos por proteínas PEGiladas procedentes del secretoma de Bifidobacterium adolescentis a partir de los cuales se obtuvo una reducción de la infección viral, no se observó efecto citotóxico y particularmente, se observó que podrían producir un aumento de la proteína de unión celular ocludina. Así, a partir de lo anterior surgió la pregunta de si estas proteínas pueden internalizarse en las células para producir el efecto de aumento de ocludina, al igual que la necesidad de cuantificar este efecto, recordando además, que están recubiertas de polietilenglicol de alta densidad y por tanto, teóricamente no deberían entrar. A partir de lo anterior, en este trabajo se buscó evaluar la capacidad de internalización de las proteínas PEGiladas del secretoma de B. adolescentis (PPEGBa) en las células intestinales polarizadas C2BBe1, por medio del marcaje fluorescente y observación de las proteínas, además de su efecto en la expresión de la proteína ocludina por medio de la cuantificación de ocludina total por fluorometría. Se determinó que las PPEGBa se acumulan en la periferia celular y además promueven la expresión de la proteína de unión celular ocludina. Estos resultados sugieren que las PPEGBa podrían tener la capacidad de fortalecer la barrera intestinal.