Evaluación del desempeño de la tecnología MALDI TOF MS en la identificación de líneas celulares asociadas a leucemias linfoide y mieloide aguda
Fecha
2020-07-07Autor(es)
Duarte Torres, YuranyDirector(es)
Parra Giraldo, Claudia MarcelaPublicador
Pontificia Universidad Javeriana
Facultad
Facultad de Ciencias
Programa
Maestría en Ciencias del Laboratorio Clínico
Título obtenido
Magíster en Ciencias del Laboratorio Clínico
Tipo
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestría
COAR
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Citación
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Título en inglés
Evaluation of the performance of MALDI TOF MS technology in the identification of cell lines associated with lymphoid and acute myeloid leukemiasResumen
Las leucemias agudas (LA) son un grupo de neoplasias hematopoyéticas, caracterizadas por la proliferación maligna de blastos que tienen la capacidad de infiltrar sangre periférica, médula ósea, otros órganos y sistemas. La leucemia linfoide aguda predomina en la población infantil, mientras que la leucemia mieloide aguda es más frecuente en adultos, el diagnóstico de leucemias agudas requiere de un grupo de trabajo interdisciplinario que integra a la morfología, estudio del inmunofenotipo, inmunohistoquímica de biopsia de médula ósea, citogenética y estudios de biología molecular, recientemente con la aparición de las ciencias ómicas se ha revolucionado el estudio de diversas enfermedades, entre ellas las leucemias agudas, la proteómica tiene un rol importante en la identificación de nuevos biomarcadores que fortalecen la medicina de precisión en este tipo de neoplasias, con el análisis del proteoma se ha descrito que se pueden clasificar y discriminar los diferentes subtipos de leucemia aguda, una de las técnicas más usadas es MALDI TOF MS (tiempo de vuelo de ionización por desorción láser asistida por matriz por espectrometría de masas).
El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el desempeño de la tecnología MALDI TOF MS en la identificación de líneas celulares derivadas de leucemia linfoide aguda B (Reh) y leucemias mieloides agudas (K562, OCI-AML3 y U937), mediante la obtención y análisis de los espectros de masas obtenidos mediante MALDI TOF MS en líneas celulares derivadas de leucemia mieloide aguda y de leucemia linfoide aguda B, así como evaluar la capacidad de discriminación entre sí. Para ello se realizó extracción de proteínas, análisis y comparación de cada una de las líneas celulares por MALDI TOF MS.
Se encontró que la tecnología MALDI-TOF MS fue eficiente para diferenciar líneas celulares derivadas de leucemia mieloide aguda y linfoide aguda, con un buen análisis y una adecuada selección de espectros se lograron crear MSP derivados de las bibliotecas con la capacidad de discriminar las diferentes líneas celulares.
Con la restricción de un rango de masas en la línea celular linfoide Reh, se observó que en la región entre 7000 y 13500 m/z se retienen los picos más significativos y se eliminan picos con un comportamiento similar, evitando identificaciones cruzadas entre las líneas celulares.
El apoyo diagnóstico a futuro de MALDI-TOF MS, beneficia a los laboratorios responsables de leucemias agudas en la reducción de tiempos, recursos e inicio temprano de terapias que repercuten en la mejora de la calidad de vida de los pacientes.
Abstract
Acute leukemias (AL) are a group of hematopoietic neoplasms, characterized by the appearance of malignant blasts that have the ability to infiltrate peripheral blood, bone marrow, other organs and systems. Acute lymphoid leukemia predominates in children, while acute myeloid leukemia is more frequent in adults, the diagnosis of acute leukemia requires an interdisciplinary work group that integrates morphology, immunophenotype study, bone marrow biopsy immunohistochemistry, cytogenetics and molecular biology studies, recently with the appearance of omic sciences the study of various diseases has been revolutionized, including acute leukemias, proteomics has an important role in the identification of new biomarkers that strengthen precision medicine in this type of neoplasms, with the analysis of the proteome it has been described that the different subtypes of acute leukemia can be classified and discriminated, one of the most used techniques is MALDI TOF MS (matrix assisted laser desorption ionization time of flight by spectrometry mass).
The objective of this work was to evaluate the performance of MALDI TOF MS technology in the identification of cell lines derived from acute lymphoid leukemia B (Reh) and acute myeloid leukemias (K562, OCI-AML3 and U937), by obtaining and analyzing the mass spectra obtained by MALDI TOF MS in cell lines derived from acute myeloid leukemia and acute lymphoid leukemia B, as well as to evaluate the ability to discriminate between them. For this, protein extraction and analysis of each of the cell lines by MALDI TOF MS was performed.
It was found that the MALDI-TOF MS technology was efficient to differentiate cell lines derived from acute myeloid and acute lymphoid leukemia, since with good analysis and an adequate selection of spectra, MSP derived from the libraries with the ability to discriminate the different cell lines.
With the restriction of a range of masses in the Reh lymphoid cell line, it is ruled out that in the region between 7000 and 13500 m/z the most significant peaks are retained and peaks with a similar behavior are eliminated, preventing cross-line identifications between the cell lines.
The future diagnostic support of MALDI-TOF MS benefits the laboratories responsible for acute leukemias in reducing time, resources and early initiation of therapies that have an impact on improving the quality of life of patients.
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ColombiaTemas
Maestría en ciencias del laboratorio clínico - Tesis y disertaciones académicasLeucemia aguda - Bogotá (Colombia)
Proteómica - Bogotá (Colombia)
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