Determinación de las condiciones de cultivo de Stenotrophomonas rhizophilia USBA GBX-843ª para la producción de enzimas lipoliticas
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Date
2022-12-14Evaluators
Comba González, Natalia BeatrizPublisher
Pontificia Universidad Javeriana
Faculty
Facultad de Ciencias
Program
Microbiología Industrial
Obtained title
Microbiólogo (a) Industrial
Type
Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
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English Title
Determination of culture conditions of Stenotrophomonas rhizophila USBA GBX-843A for the production of lipolytic enzymes.Resumen
Las enzimas lipolíticas, adaptadas al frío, se caracterizan por llevar a cabo reacciones de hidrólisis en sistemas acuosos o de síntesis en presencia de solventes orgánicos sobre enlaces tipo ésteres carboxílicos de los lípidos a bajas temperaturas. Aunque estas enzimas son producidas por los organismos psicrófilos, las enzimas bacterianas extracelulares, presentan características especiales, que pueden ser aprovechadas para su aplicación en procesos industriales. Lo anterior ha despertado el interés por estudiar microorganismos de ambientes fríos, productores de enzimas lipolíticas y determinar las condiciones de cultivo adecuadas para su producción.
En este trabajo se evaluaron las condiciones de cultivo, para la producción de enzimas lipolíticas por la cepa S. rhizophila USBA GBX-843A aislada de suelo glaciar del parque Nacional Natural los Nevados (PNN). Para tal fin, inicialmente se determinó la temperatura óptima de crecimiento y producción de enzimas. Posteriormente, se evaluó la influencia de los componentes del medio de cultivo, sobre la producción de enzimas lipolíticas (fuentes de carbono fuente de nitrógeno, sales) mediante dos diseños Plackett-Burman, el primero con 11 factores y el segundo con 9 y finalmente se determinó la preferencia por sustrato para la/las enzimas lipolíticas producidas.
En cuanto a la cinética de crecimiento, se presentaron tendencias similares en la productividad de biomasa a ambas temperaturas con 0,630 y 0,632 U.L-1.h-1 y la mayor productividad se presentó a 15°C con 2,797 U.L-1h-1. Respecto a la influencia de los componentes en el medio de cultivo, aunque los resultados del diseño Plackett-Burman, no permitieron validar el modelo, se pudo determinar que algunos factores como el K2HPO4, FeSO4, MgSO4 y fuentes de nitrógeno como: cloruro de amonio y peptona, mostraron valores significativos y posiblemente influencian la producción de enzimas lipolíticas. Finalmente, las enzimas lipolíticas presentaron preferencia por sustratos lipídicos de cadena corta y mediana (pNP4-pNP10). En Conclusión, la cepa de Stenotrophomonas rhizophila USBA GBX-843A, presenta un mayor crecimiento y producción de enzimas lipolíticas a 15°C, preferencia por sustratos de cadena corta y mediana. Los componentes del medio de cultivo (fuentes de nitrógeno y sales), que posiblemente tienen mayor influencia en la producción de enzimas lipolíticas, deben ser evaluados con mayor profundidad.
Abstract
Lipolytic enzymes, adapted to cold, are characterized by carrying out hydrolysis reactions in aqueous or synthetic systems in the presence of organic solvents on carboxylic ester-like bonds of lipids at low temperatures. Although these enzymes are produced by psychrophilic organisms, extracellular bacterial enzymes present special features that can be used for their application in industrial processes. This has awakened the interest to study microorganisms from cold environments, producers of lipolytic enzymes and to determine the appropriate culture conditions for their production.
In this work, the culture conditions for the production of lipolytic enzymes by the strain S. rhizophila USBA GBX-843A isolated from glacial soil of the Los Nevados National Natural Park (PNN) were evaluated. For this purpose, the optimum temperature for growth and enzyme production was initially determined. Subsequently, the influence of the components of the culture medium on the production of lipolytic enzymes (carbon sources, nitrogen source, salts) was evaluated by means of two Plackett-Burman designs, the first with 11 factors and the second with 9, and finally the preference for substrate for the lipolytic enzymes produced was determined.
Regarding growth kinetics, similar trends in biomass productivity were presented at both temperatures with 0.630 and 0.632 U.L-1.h-1 and the highest productivity was presented at 15°C with 2.797 U.L-1h-1. Regarding the influence of the components in the culture medium, although the results of the Plackett-Burman design did not allow validation of the model, it was possible to determine that some factors such as K2HPO4, FeSO4, MgSO4 and nitrogen sources such as ammonium chloride and peptone, showed significant values and possibly influence the production of lipolytic enzymes. Finally, lipolytic enzymes showed preference for short and medium chain lipid substrates (pNP4-pNP10). In conclusion, the Stenotrophomonas rhizophila strain USBA GBX-843A showed a higher growth and production of lipolytic enzymes at 15°C, with a preference for short- and medium-chain substrates. The components of the culture medium (nitrogen sources and salts), which possibly have a greater influence on lipolytic enzyme production, should be further evaluated.
Themes
Microbiología industrial - Tesis y disertaciones académicasEnzimas
Stenotrophomonas rhizophilia
Hidrólisis
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