Evaluación in vitro del crecimiento de bacterias cariogénicas a distintos ph salivales utilizando mediciones de bioimpedancia
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2022-11-30Share this record
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English Title
In vitro assessment of the growth of cariogenic bacteria at different salivary ph using bioimpedance measurementsResumen
Antecedentes: La evaluación de crecimiento de cultivos mediante el principio de la bioimpedancia puede representar una opción simple, rápida y a tiempo real de identificar el crecimiento de bacterias cariogénicas, aplicándose complementariamente a técnicas convencionales. Objetivo: Evaluar el crecimiento de Streptococcus mutans (SM), Streptococcus salivarius (SS) y Lactobacillus acidophilus (LA) sobre un modelo de biopelícula (3B) formada en láminas de esmalte bovino a diferentes pH (5.0, 6.5 y 9.0) mediante mediciones por bioimpedancia. Métodos: Se prepararon 12 láminas de esmalte bovino con incrustaciones de amalgama de plata equidistantes. Para cada evaluación por bioimpedancia, se sembró 14 mL de caldo de cultivo BHI + levadura con inóculo de bacterias SM, SS, LA y 3B 0.5 McFarland, a cada condición de pH Se evaluó cada 2 horas por 30 horas a 37ºC la impedancia a frecuencias de 100-20000 Hz y complementariamente se cuantificó el crecimiento por métodos de goteo, de las unidades formadoras de colonias (UFC) a 24 horas y absorbancia óptica de cada bacteria a diferentes pH. Cada prueba se realizó por triplicado en dos repeticiones para cada condición de crecimiento. Se realizó un cálculo de regresión lineal entre la respuesta de bioimpedancia- absorbancia y la respuesta de bioimpedancia-conteo de UFC/mL y coeficiente de correlación entre las variables. Resultados: Se identificó el crecimiento de SM, SS, LA y 3B mediante técnicas de bioimpedancia a pH 5.0 y 6.5. No se identificó crecimiento a pH 9.0 en ninguna de las muestras. Conclusiones: Se comprobó por medio de mediciones basadas en bioimpedancia el crecimiento de bacterias cariogénicas a pH ácido y neutro. Se determinaron las fases de crecimiento bacteriano latencia, exponencial, estacionaria y muerte bacteriana durante las mediciones por bioimpedancia.
Palabras clave: bioimpedancia, crecimiento bacteriano, S. mutans, S. salivarius, L. acidophilus, pH.
Abstract
Background: The assessment of culture growth through the principle of bioimpedance can represent a simple, fast and real-time option to identify the growth of cariogenic bacteria, being applied in addition to conventional techniques. Objective: To evaluate the growth of Streptococcus mutans (SM), Streptococcus salivarius (SS) and Lactobacillus acidophilus (LA) on a biofilm model (3B) formed in bovine enamel sheets at different pH's (5.0, 6.5 and 9.0) by measurements by bioimpedance. Methods: Twelve sheets of bovine enamel with equidistant silver amalgam inlays were prepared. For each evaluation by bioimpedance, 14 mL of BHI + yeast culture broth was sown with inoculum of SM, SS, LA and 3B 0.5 McFarland bacteria, at each pH condition. The impedance at frequencies was evaluated every 2 hours for 30 hours at 37ºC. from 100-20000 Hz and complementary growth was quantified by drip methods, of the colony-forming units (CFU) at 24 hours and absorbance of each bacterium at different pH. Each test was performed in triplicate in two repetitions for each growth condition. A linear regression calculation was performed between the bioimpedance-absorbance response and the bioimpedance-CFU/mL count response and correlation coefficient between the variables. Results: The growth of SM, SS, LA and 3B was identified by means of bioimpedance techniques at pH 5.0 and 6.5. No growth at pH 9.0 was identified in any of the samples. Conclusions: The growth of cariogenic bacteria at acidic and neutral pH was verified by means of measurements based on bioimpedance. Latency, exponential, stationary, and bacterial death phases of bacterial growth were determined during bioimpedance measurements.
Keywords: bioimpedance, bacterial growth, S. mutans, S. salivarius, L. acidophilus, pH.
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