Presencia de Salmonella spp. en fuentes de agua en granjas porcícolas, determinación de factores de riesgo asociados y estrategias "in vitro" para su control

Abstract

Salmonella spp. es un microorganismo patógeno zoonótico de importancia mundial. Causa salmonelosis en humanos y otros animales y se reconoce como una enfermedad transmitida por alimentos (ETA) y transmitida por el agua (WBD). La carne de cerdo, pollo y res, los huevos, las frutas y las verduras están implicados en brotes alimentarios que causan infección. Por esta razón, en Europa y Estados Unidos, se reporta como la segunda zoonosis en humanos. En Colombia, es el quinto agente etiológico implicado en brotes alimentarios. Salmonella spp. entra en la granja de forma natural, principalmente en agua contaminada, o por reservorios naturales como roedores, insectos, aves u otras especies silvestres; también los alimentos contaminados y, a veces, los trabajadores son quienes propagan la bacteria; por lo tanto, su propagación en la granja debe controlarse para reducir la prevalencia, logrando un impacto en la salud pública. De esta manera, el objetivo es conocer la prevalencia de Salmonella spp. en agua de granjas porcinas del país y determinar los factores de riesgo asociados a su presencia para establecer estrategias “in vitro” utilizando ácidos orgánicos para su control. Para lograr el objetivo principal, se seleccionaron 103 fincas en 26 departamentos y distribuidas en tres zonas sanitarias según la clasificación de la Peste Porcina Clásica (PPC). Se tomaron muestras individuales de las fincas seleccionadas durante septiembre y diciembre de 2020 de agua de captación, agua de tanque y agua de bebederos de tetina. Las muestras se procesaron siguiendo el protocolo APHA 9260-B, y para la detección/identificación de Salmonella spp. se utilizó el Sistema de Detección Molecular MDS-3M Salmonella-2; las cepas aisladas se confirmaron mediante el equipo MALDI Biotyper®. Se procesaron un total de 310 muestras correspondientes a las 103 fincas seleccionadas, obteniendo 66 muestras positivas para una prevalencia total del 21,3%; específicamente, en agua de captación fue del 21,2% (22/104), agua de tanques 22,3% (23/103) y agua de bebederos de tetina 20,6% (21/103). La serotipificación se realizó mediante la técnica de PCR para identificar el serovar Typhimurium y el esquema de Kauffmann-White-Le Minor para identificar otros serovares. Se determinaron veintisiete serovares. Typhimurium fue el serovar predominante, con un 22,7% (15/66). Los otros serotipos más frecuentes fueron S. Chester, S. Schwarzengrund, S. Schoeneberg, S. Braenderup, S. Newport y S. Reading. Los factores de riesgo se determinaron después de una encuesta epidemiológica, donde se investigaron la bioseguridad, las prácticas de manejo, la limpieza y desinfección, el manejo de la mortalidad y el estiércol porcino. Los datos se analizaron mediante tablas cruzadas de 2 x 2 para analizar la asociación estadísticamente significativa (p=0,05). Para establecer el Odds Ratio (OR), se utilizaron la prueba de X2 y la prueba de Fisher en el programa R. Encontramos 12 factores de riesgo asociados con la presencia de Salmonella, como el no uso de pediluvios (p=0,010), filtro sanitario (en la entrada de la granja) con ducha, cambio de ropa y calzado (p=0,011), y tipo de agua utilizada para el lavado y desinfección de corrales (p=0,003), entre otros. Para la reducción de la presencia de Salmonella spp. en agua, se realizaron pruebas “in vitro” utilizando una mezcla de ácidos orgánicos (fórmico, propiónico, acético, láctico) y desafiándola con cinco cepas de S. Typhimurium obtenidas del agua de las fincas muestreadas. Se realizó un diseño experimental de Plackett Burman con tres puntos centrales para probar el efecto de la mezcla de ácidos orgánicos; en este diseño se evaluaron cinco factores (fórmico, propiónico, acético, láctico) y valores de pH (3,6 y 4,0). La matriz de este diseño arrojó 12 tratamientos y tres puntos centrales. Como resultado, se obtuvo que la combinación de ácidos orgánicos a pH 3,6 inactiva Salmonella spp. hasta en un 98%. La detección de Salmonella spp. en el agua de las granjas porcinas confirma que es la principal fuente de diseminación en la granja. Los fallos en las medidas de bioseguridad interna y externa y en los procesos de limpieza y desinfección de instalaciones o vehículos deben ser permanentemente vigilados para reducir el riesgo de infección en los animales. Esto tendrá un impacto positivo en la reducción de la infección en humanos. Cabe destacar que la importancia de identificar los serotipos aislados en agua contribuye al conocimiento de su circulación en las unidades de producción y en los animales, permitiendo establecer la asociación de su presencia en la finca y el seguimiento epidemiológico en la producción primaria, logrando Colombia el primer reporte sobre la diversidad de serotipos en agua para uso porcino.