Caracterización molecular de la virulencia transferible de Enterococcus faecium de origen nosocomial

Abstract

El gen hylEfm codifica para una hialuronidasa-glicosil hidrolasa y se encuentra en plásmidos (pHylEfm) en aislamientos clínicos de E. faecium. Este trabajo evaluó la co-transferencia del pHylEfm con genes de resistencia a antibióticos (GRAs) en E. faecium y caracterizó el papel de pHylEfm en la virulencia in vivo. La transferencia de pHylEfm y de GRAs se realizó por conjugación in vitro y el estudio de los plásmidos por digestión con S1 y I-Ceu-I. El efecto de la adquisición del pHylEfm por una cepa de E. faecium comensal (TX1330RF) fue evaluado utilizando los modelos murinos de peritonitis e infección urinaria| una mutante de pHylEfm fue obtenida empleando el sistema PheS* y su efecto también fue estudiado en los mismos modelos. Se realizó genotipificación de E. faecium resistentes a vancomicina (VREfm) de los países de la región Andina. Resultados: a) El pHylEfm se encontraba en megaplásmidos y se transfería entre cepas de E. faecium| b) co-transferencia hylEfm con genes de resistencia a gentamicina y vancomicina que se co-localizan en pHylEfm| c) La adquisición de pHylEfm por TX1330RF incrementó la virulencia en el modelo de peritonitis y la colonización del uroepitelio murino| d) La deleción de seis genes en pHylEfm atenuó la virulencia in vivo de TX1330RF, pero la complementación en trans con hylEfm o hip no restauró la virulencia| e) Aislamientos del complejo clonal (CC17) fueron encontrados y los genes fms20-21 (codifican para pili) se detectaron en plásmidos co-existiendo con hylEfm y vanA. Conclusiones: a) pHylEfm media colonización, virulencia y resistencia a antibióticos, su diseminación podría explicar parcialmente el éxito de E. faecium como patógeno nosocomial| b) La región hylEfm podría estar comprometida en el incremento de la virulencia, pero hylEfm no explica las propiedades patogénicas del pHylEfm| c) El método PheS* facilita la manipulación genética en E. faecium y en otros microorganismos.