Evaluación y comparación de 3 protocolos de extracción y amplificación del ADN contenido en exsicados de orquídeas conservadas en colecciones de herbario

Mazo Molina, Laura Cristina

Evaluación y comparación de 3 protocolos de extracción y amplificación del ADN contenido en exsicados de orquídeas conservadas en colecciones de herbario

dc.contributor.advisor	Gómez Gutiérrez, Alberto 1958-
dc.contributor.author	Mazo Molina, Laura Cristina
dc.date.accessioned	2014-05-07T23:10:38Z
dc.date.accessioned	2014-10-09T02:56:13Z
dc.date.accessioned	2016-03-29T14:27:02Z
dc.date.accessioned	2020-04-15T16:19:39Z
dc.date.available	2014-05-07T23:10:38Z
dc.date.available	2014-10-09T02:56:13Z
dc.date.available	2016-03-29T14:27:02Z
dc.date.available	2020-04-15T16:19:39Z
dc.date.created	2011
dc.description.abstract	Los tejidos vegetales provenientes de muestras de herbario contienen ADN antiguo que ha sufrido degradación post mortem, de tal forma que pequeñas cantidades de material genético, eventualmente degradado, pueden ser extraídas de dichas muestras. Se han propuesto protocolos para extraer ADN antiguo libre de químicos e impurezas a partir de muestras de herbario, pero estos se limitan a determinados grupos de plantas, no encontrándose reportado un protocolo específico para extraer ADN proveniente de exsicados de orquídeas. Por lo tanto, este proyecto se realizó con el fin de comparar y determinar cuál de los 3protocolos de extracción de ADN vegetal propuestos por Quintanilla et al. (2010), Cota et al. (2006) y Jobes et al. (1995) permite extraer ADN de buena calidad, susceptible a secuenciación y técnicas de PCR. Para el efecto, se utilizaron de 2 a 5 mg de tejidos provenientes de 7 exsicados de orquídeas recolectadas entre los años 1948 y 2011, preservadas en el Herbario ?Lorenzo Uribe Uribe, S. J.? de la Pontificia Universidad Javeriana- Bogotá (HPUJ).De los protocolos evaluados, el más efectivo fue Quintanilla et al. ya que con este se obtuvieron productos de PCR en 6 de las 7 muestras estudiadas, y las relaciones de pureza ADN/Proteína (260/280 y 260/230) fueron las más óptimas. El protocolo menos exitoso fue el de Jobes et al. con el cual no hubo amplificación de ninguna de las 7 muestras evaluadas. En conclusión, el reactivo empleado en la lisis de pared y membrana celular es muy importante, siendo el *-mercaptoetanol y CTAB utilizados en Quintanilla et al., más efectivo que la Proteinasa K y SDS empleados en Jobes et al.; de igual forma, el acetato de amonio resulta ser más apropiado para precipitar ácidos nucléicos, que el acetato de sodio utilizado en Jobes et al, y Cota et al. Se propone el uso del protocolo establecido por Quintanilla et al., para extraer ADN de calidad a partir de exsicados de orquídeas conservadas en Herbario hasta por 40 años.	spa
dc.description.degreelevel	Pregrado	spa
dc.description.degreename	Biólogo (a)	spa
dc.format	PDF	spa
dc.format.mimetype	application/pdf	spa
dc.identifier.doi	https://doi.org/10.60794/1eqa-xn22
dc.identifier.instname	instname:Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.identifier.reponame	reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.identifier.repourl	repourl:https://repository.javeriana.edu.co	spa
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/10554/8874
dc.language.iso	spa	spa
dc.publisher	Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.publisher.faculty	Facultad de Ciencias	spa
dc.publisher.program	Biología	spa
dc.rights.accessrights	info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coar	http://purl.org/coar/access_right/c_abf2	spa
dc.rights.licence	Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional	*
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dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/	*
dc.subject	Extracción ADN	spa
dc.subject	ADN	spa
dc.subject	Espectrofotometría	spa
dc.subject.armarc	Biología - Tesis y disertaciones académicas	spa
dc.subject.armarc	Extractos vegetales	spa
dc.subject.armarc	Orquídeas	spa
dc.subject.armarc	Herbarios	spa
dc.title	Evaluación y comparación de 3 protocolos de extracción y amplificación del ADN contenido en exsicados de orquídeas conservadas en colecciones de herbario	spa
dc.type.coar	http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f	spa
dc.type.driver	info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.hasversion	http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
dc.type.local	Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado	spa