Generación de una línea celular estable para el canal de membrana receptor de potencial transitorio de melastina 8 (TRPM8) en células CHO

Medina Bustos, Angie

Generación de una línea celular estable para el canal de membrana receptor de potencial transitorio de melastina 8 (TRPM8) en células CHO

dc.contributor.advisor	Sutachan Rubio, Jhon Jairo
dc.contributor.author	Medina Bustos, Angie
dc.contributor.evaluator	Albarracín, Sonia Luz
dc.date.accessioned	2022-08-16T12:08:12Z
dc.date.available	2022-08-16T12:08:12Z
dc.date.created	2022-08-11
dc.description.abstract	El canal de membrana receptor de potencial transitorio de melastina 8 (TRPM8), cumple un rol importante en la transducción de la nocicepción en una amplia gama de patologías humanas, razón por la que es un blanco de relevancia para el entendimiento y tratamiento del dolor. Sin embargo, el desarrollo farmacológico inespecífico de reguladores de la función de este canal no ha sido exitosa debido a la aparición de efectos secundarios indeseados. Lo anterior hace necesario la generación de modelos de expresión heteróloga que permitan entender las propiedades fisiológicas del canal TRPM8 y las vías de señalización que lo regulan, para la generación de mejores fármacos. Para tal objetivo, en el presente trabajo se generó una línea de expresión estable del canal TRPM8 a partir de células CHO transfectadas con el plásmido pcDNA3TRPM8. Los resultados obtenidos muestran que para la generación de un clon de células CHO con expresión estable del canal TRPM8 es necesario tratar las células CHO transfectadas con 0.8 mg/mL de geneticina por 6 días antes de la generación de la línea y que para la validación por PCR de la inserción en el ADN genómico es necesario pasajear al menos las células tres veces. A partir de la línea celular de expresión estable generada, es posible hacer el tamizaje de extractos o moléculas que puedan regular el canal TRPM8 y que tengan potencial antinociceptivo.	spa
dc.description.abstractenglish	The melastin transient potential receptor membrane channel 8 (TRPM8), plays an important role in the transduction of nociception in a wide range of human pathologies, which is why it is a relevant target for the understanding and treatment of pain. However, the non-specific pharmacological development of regulators of the function of this channel has not been successful due to the appearance of unwanted side effects. This makes it necessary to generate heterologous expression models that allow us to understand the physiological properties of the TRPM8 channel and the signaling pathways that regulate it, for the generation of better drugs. For this purpose, in the present work a stable expression line of the TRPM8 channel was generated from CHO cells transfected with the plasmid pcDNA3TRPM8. The results obtained show that for the generation of a clone of CHO cells with stable expression of the TRPM8 channel it is necessary to treat the transfected CHO cells with 0.8 mg/mL of geneticin for 6 days before the generation of the line and that for the validation by PCR of the insert into genomic DNA is necessary to passage the cells at least three times. From the stable expression cell line generated, it is possible to screen for extracts or molecules that can regulate the TRPM8 channel and that have antinociceptive potential.	spa
dc.description.degreelevel	Pregrado	spa
dc.description.degreename	Biólogo (a)	spa
dc.format	PDF	spa
dc.format.mimetype	application/pdf	spa
dc.identifier.doi	https://doi.org/10.60794/dfcb-zw77
dc.identifier.instname	instname:Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.identifier.reponame	reponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.identifier.repourl	repourl:https://repository.javeriana.edu.co	spa
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/10554/61345
dc.language.iso	spa	spa
dc.publisher	Pontificia Universidad Javeriana	spa
dc.publisher.faculty	Facultad de Ciencias	spa
dc.publisher.program	Biología	spa
dc.rights.accessrights	info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coar	http://purl.org/coar/access_right/c_abf2	spa
dc.rights.licence	Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional	*
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dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/	*
dc.subject	TRPM8	spa
dc.subject	Dolor	spa
dc.subject	Modelos de expresión heteróloga	spa
dc.subject	Neuronas del ganglio de la raíz dorsal	spa
dc.subject	Células CHO	spa
dc.subject.armarc	Biología - Tesis y disertaciones académicas	spa
dc.subject.armarc	Células tumorales	spa
dc.subject.armarc	Oncología	spa
dc.subject.armarc	Manejo del dolor	spa
dc.subject.keyword	TRPM8	spa
dc.subject.keyword	Pain	spa
dc.subject.keyword	Heterologous expression patterns	spa
dc.subject.keyword	Dorsal root ganglion neurons	spa
dc.subject.keyword	CHO cells	spa
dc.title	Generación de una línea celular estable para el canal de membrana receptor de potencial transitorio de melastina 8 (TRPM8) en células CHO	spa
dc.title.english	Generation of a Stable Cell Line for Melastin Transient Potential Receptor Membrane Channel 8 (TRPM8) in CHO Cells	spa
dc.type.coar	http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.driver	info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.hasversion	http://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
dc.type.local	Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado	spa