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Efecto anti-proliferativo del extracto hexánico de las hojas de hymenaea courbaril l. (Algarrobo) y su relacion con la inducción de apoptosis en células de cáncer de próstata PC-3

dc.contributor.advisorMéndez Callejas, Gina
dc.contributor.advisorCelis Zambrano, Crispin
dc.contributor.authorDelgado Carreño, Claudia Viviana
dc.contributor.evaluatorModesti Costa, Geison
dc.contributor.evaluatorJuan Carlos, Sepúlveda Arias
dc.contributor.evaluatorFreddy, Ramos Rodriguez
dc.date.accessioned2022-07-25T19:46:18Z
dc.date.available2022-07-25T19:46:18Z
dc.date.created2022
dc.description.abstractHymenaea courbaril L. (algarrobo) es una planta neotropical perteneciente a la familia Fabaceae la cual ha sido empleada en la medicina tradicional latinoamericana para tratar diversas enfermedades, entre estas, afecciones de la próstata, incluyendo el cáncer. Para el 2018, el cáncer de próstata fue el tipo de cáncer con mayor incidencia y el segundo tipo de cáncer con la mayor tasa de mortalidad masculina en Colombia [1]. Su tratamiento involucra frecuentemente el uso de quimioterapia, el cual produce efectos secundarios que afectan la calidad de vida del paciente, por esto, es necesaria la búsqueda de nuevas moléculas efectivas y seguras que tengan efectos selectivos sobre la eliminación de estas células malignas. En relación con los efectos anticancerígenos de esta especie vegetal en la próstata, no hay evidencias científicas que soporten tales propiedades. De esta manera, tres extractos de diferentes polaridades de las hojas fueron evaluados por medio del ensayo del MTT para determinar la citotoxicidad en la línea celular tumoral de próstata PC-3, seguido de fraccionamientos bio-guiados para la obtención de la fracción más citotóxica, teniendo en cuenta el índice de selectividad por comparación con la citotoxicidad sobre una línea celular normal. La fracción más citotóxica fue analizada por Cromatografía de gases/Espectrometría de Masas (GC/MS) para identificar el compuesto mayoritario activo. Se analizó la despolarización de la membrana mitocondrial por el ensayo JC- 10 por medio de microscopia y citometría de flujo, también se detectaron cambios morfológicos en las células y en el nivel de expresión de las proteínas pro-apoptóticas Bim, Bax, las Caspasas activas 3 y 7 y las anti-apoptóticas Bcl-2 y Bcl-xL por Western Blot, en respuesta al tratamiento con el compuesto mayoritario. La fracción más activa fue denominada SFB.3 obtenida del extracto hexánico (IC50= 86.81 μg/mL/ IS= 1.71). El óxido de cariofileno (OXC) fue identificado como el compuesto mayoritario con un 24.95% de abundancia relativa de la fracción más activa de las hojas de Hymenaea courbaril (SFB.3), que tuvo una IC50= 45.7 μg/mL (207.4 μM) / IS= 1.96, concentración a la cual, indujo la despolarización de la membrana mitocondrial, activación de Bax e inducción de apoptosis por activación de la Caspasa-3 a las 24 horas de tratamiento. Estos resultados sugieren que el OXC, tiene potencial como un agente anti-proliferativo eficaz y seguro en células PC-3, mediado por la despolarización de la membrana mitocondrial, la inducción de apoptosis y baja toxicidad hacia las células normales.spa
dc.description.abstractenglishHymenaea courbaril L. (The West Indian Locust) is a neotropical plant belonging to the Fabaceae family that has been used in South America´s traditional medicine to treat various diseases, among them, including prostate conditions as well cancer. Prostate cancer has the highest incidence and is the second type with the highest male mortality rate in Colombia in 2018 [1]. Treatment frequently involves chemotherapy, which carries side effects that affect the patient's quality life; therefore, it becomes necessary the search for new effective and safer molecules that have selective effects on the elimination of these malignant cells. There is no scientific evidence to support such anticancer properties of the plant in the prostate. Therefore, three extracts of different polarities of the leaves were evaluated using the MTT test to determine the cytotoxicity in the prostate tumor cell line PC 3, followed by bio-guided fractionations to obtain the most cytotoxic fraction considering the selectivity index by comparison with the cytotoxicity of a normal cell line. The most cytotoxic fraction was analyzed by Gas Chromatography/Mass Spectrometry (GC/MS) to identify the active majority compound. Depolarization of the mitochondrial membrane was analyzed by the JC-10 assay employing microscopy and flow cytometry, morphological changes and variations in the level of the expression of the pro-apoptotic proteins Bim, Bax, active Caspases 3 and 7 and the anti-apoptotic protein Bcl-2 were detected by Western Blot, in response to treatment with the majority compound the most active fraction was called SFB.3 obtained from the hexane extract (IC50 = 86.81μg/mL / IS = 1.71). Caryophyllene oxide was identified as the majority compound with a 24.95% relative abundance within the hexane leaf extract of Hymenaea courbaril (SFB.3) and had an IC50= 45.7μg/mL (207.4 μM) / IS= 1.96 concentration at which it induced depolarization of the mitochondrial membrane, activation of Bax and induction of apoptosis by activation of Caspase-3 at 24 hours of treatment. These results suggest that caryophyllene oxide has potential as an effective and safe anti-proliferative agent in PC-3 cells, mediated by depolarization of the mitochondrial membrane, induction of apoptosis, and low toxicity toward normal cells.spa
dc.description.degreelevelMaestríaspa
dc.description.degreenameMagíster en Ciencias Biológicasspa
dc.formatPDFspa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.doihttps://doi.org/10.11144/Javeriana.10554.60967
dc.identifier.instnameinstname:Pontificia Universidad Javerianaspa
dc.identifier.reponamereponame:Repositorio Institucional - Pontificia Universidad Javerianaspa
dc.identifier.repourlrepourl:https://repository.javeriana.edu.cospa
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10554/60967
dc.language.isospaspa
dc.publisherPontificia Universidad Javerianaspa
dc.publisher.facultyFacultad de Cienciasspa
dc.publisher.programMaestría en Ciencias Biológicasspa
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coarhttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2spa
dc.rights.licenceAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional*
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dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/*
dc.subjectCáncer de próstataspa
dc.subjectPC-3spa
dc.subjectHymenaea courbaril L.spa
dc.subjectAlgarrobospa
dc.subjectÓxido de cariofilenospa
dc.subjectCitotoxicidadspa
dc.subject.armarcMaestría en ciencias biológicas - Tesis y disertaciones académicasspa
dc.subject.armarcCáncer de próstataspa
dc.subject.armarcBacteriasspa
dc.subject.armarcHongosspa
dc.subject.armarcAlgarrobospa
dc.subject.armarcCitotoxicidad por mediación celularspa
dc.subject.keywordProstate cancerspa
dc.subject.keywordPC-3spa
dc.subject.keywordHymenaea courbaril L.spa
dc.subject.keywordWest Indian Locust treespa
dc.subject.keywordCaryophyllene oxidespa
dc.subject.keywordCytotoxicityspa
dc.titleEfecto anti-proliferativo del extracto hexánico de las hojas de hymenaea courbaril l. (Algarrobo) y su relacion con la inducción de apoptosis en células de cáncer de próstata PC-3spa
dc.title.englishAnti-proliferative effect of the hexanic extract of the leaves of hymenaea courbaril l. (Algarrobo) and its relationship with the induction of apoptosis in PC-3 prostate cancer cellsspa
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aa
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestríaspa

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Claudia Delgado 2022 EFECTO ANTI-PROLIFERATIVO DEL EXTRACTO HEXÁNICO DE LAS HOJAS DE Hymenaea courbaril L. (ALGARROBO) Y SU RELACION CON LA INDUCCIÓN DE APOPTOSIS EN CÉLULAS DE CÁNCER DE PRÓSTATA PC-3.pdf
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